一、RAS基因家族在癌癥發(fā)生中有何重要地位？

RAS基因家族是人類惡性腫瘤中突變基因家族之一。1982年，Robert Weinberg研究團(tuán)隊(duì)在人類癌癥中鑒定出RAS腫瘤基因，這一發(fā)現(xiàn)開啟了腫瘤分子生物學(xué)研究的新紀(jì)元。在三大RAS亞型中，Kirsten-RAS（KRAS）突變常見，約占所有RAS突變的86%，其次是神經(jīng)母細(xì)胞瘤-RAS（NRAS，11%）和哈維-RAS（HRAS，3%）。KRAS突變廣泛存在于多種實(shí)體腫瘤中，特別是在胰腺癌（約90%）、結(jié)直腸癌（約45%）和非小細(xì)胞肺癌（約35%）中檢出率。由于KRAS在腫瘤發(fā)生發(fā)展中的核心作用，該靶點(diǎn)一直是癌癥治療研究的重要方向。

二、KRAS[G12C]突變具有怎樣的分子特征？

KRAS[G12C]突變是指KRAS蛋白第12位密碼子處的甘氨酸（Gly，G）突變?yōu)榘腚装彼幔–ys，C）。這一特異性突變?cè)诜切〖?xì)胞肺癌中尤為常見，約占KRAS突變亞型的45-50%。從結(jié)構(gòu)生物學(xué)角度看，這一突變?yōu)榘邢蛑委熖峁┝霜?dú)特的機(jī)遇：突變引入的半胱氨酸殘基具有親核性的硫醇基團(tuán)（-SH），能夠與特定的小分子抑制劑形成共價(jià)鍵。這一特征使得KRAS[G12C]成為藥物設(shè)計(jì)的理想靶點(diǎn)，突破了傳統(tǒng)認(rèn)為RAS蛋白“不可成藥"的理論限制。與G12C突變不同，KRAS[G12D]突變（甘氨酸突變?yōu)樘於彼幔┰谝认侔s61%）和結(jié)直腸癌（約42%）中更為常見，顯示出KRAS突變模式的腫瘤類型特異性。

三、KRAS靶向藥物研發(fā)經(jīng)歷了怎樣的發(fā)展歷程？

在過去三十余年中，針對(duì)RAS靶點(diǎn)的藥物研發(fā)面臨巨大挑戰(zhàn)。由于RAS蛋白表面缺乏傳統(tǒng)的小分子結(jié)合口袋，其結(jié)構(gòu)曾被形象地比作“光滑的球體"，導(dǎo)致該靶點(diǎn)長期被視為“不可成藥"。這一困境在2013年發(fā)生了根本性轉(zhuǎn)變，Kevan Shokat教授團(tuán)隊(duì)在《自然》雜志上發(fā)表了里程碑式的研究，報(bào)道了能夠特異性靶向KRAS[G12C]突變體的共價(jià)抑制劑。這些抑制劑通過與第12位半胱氨酸形成共價(jià)鍵，變構(gòu)調(diào)節(jié)KRAS與鳥苷三磷酸（GTP）的親和力，干擾其與下游效應(yīng)蛋白的相互作用。這一突破為KRAS靶向治療開辟了全新路徑，此后多種KRAS[G12C]共價(jià)抑制劑相繼進(jìn)入臨床研發(fā)階段。

四、基于PROTAC的KRAS[G12C]降解策略有何創(chuàng)新意義？

蛋白降解靶向嵌合體（PROTAC）技術(shù)為KRAS[G12C]靶向治療提供了創(chuàng)新性解決方案?；赑ROTAC的KRAS[G12C]/CRBN降解劑通過雙功能分子設(shè)計(jì)，一端特異性結(jié)合KRAS[G12C]突變體，另一端募集CRL4CRBN E3泛素連接酶復(fù)合物，誘導(dǎo)靶蛋白的泛素化和蛋白酶體降解。與傳統(tǒng)抑制劑相比，PROTAC降解劑具有以下優(yōu)勢(shì)：能夠?qū)崿F(xiàn)靶蛋白的清除而非暫時(shí)抑制；具有亞化學(xué)計(jì)量的催化活性；可能克服某些耐藥機(jī)制；通過降解KRAS蛋白本身，可阻斷其信號(hào)傳導(dǎo)功能。這些特性使PROTAC技術(shù)成為KRAS靶向治療領(lǐng)域的重要發(fā)展方向。

五、KRAS[G12C]/CRBN PROTAC檢測試劑盒有哪些重要應(yīng)用？

專門針對(duì)KRAS[G12C] PROTAC降解體系開發(fā)的檢測試劑盒在藥物研發(fā)和機(jī)制研究中具有多方面應(yīng)用價(jià)值：

六、提供KRAS[G12C] /CRBN PROTAC 試劑盒的廠商有哪些？

南京優(yōu)愛蛋白自主研發(fā)的 TR-FRET Human KRAS[G12C]/CRBN PROTAC Binding Kit（貨號(hào)：UA086001），是一款基于時(shí)間分辨熒光能量共振轉(zhuǎn)移（TR-FRET）技術(shù)開發(fā)的高精度檢測平臺(tái)，專為靶向KRAS G12C突變蛋白的CRBN類PROTAC分子的研究與開發(fā)而設(shè)計(jì)。本試劑盒能夠精確檢測并定量PROTAC分子橋接E3泛素連接酶復(fù)合物CRBN與致癌靶蛋白KRAS[G12C]所形成的三元復(fù)合物，為KRAS驅(qū)動(dòng)型腫瘤的靶向蛋白降解療法開發(fā)、先導(dǎo)化合物篩選、分子優(yōu)化及作用機(jī)制研究提供高效、靈敏、均相化的標(biāo)準(zhǔn)解決方案。